RESTRICTION ENZYME


                 प्रतिबंधन एन्जाइम 

            ( Restriction Enzymes)

         वह Endonuclease एंजाइम जो DNA को एक निश्चित स्थान से छोटे छोटे टुकड़ो में तोड़ता है उसे प्रतिबंधन एंजाइम कहा जाता है |  प्रतिबंधन एंजाइम को आण्विक कैंची (Molecular scissor) भी कहा जाता है |
      वर्तमान में लगभग 900 से अधिक प्रतिबंधन एन्जाईम की खोज की जा चुकी है | ये सभी प्रतिबंधन एंजाइम जीवाणुओं के लगभग 230 प्रभेदों से प्राप्त की गयी है |  इनमें प्रत्येक प्रतिबंधन एंजाइम  विभिन्न अनुक्रमों को पहचानते है | इनमे से कुछ प्रमुख restriction Enzyme निम्नलिखित है :-
1. EcoR1           2. BamH1       3. Hind |||     4. Pvu1             

    प्रत्येक restriction Enzyme DNA के एक खास sequence पर ही काटता है | जैसे :-  
Enzyme
Source
Recognition Sequence
Cut
ECoR1
Eshcherichia coli
5'GAATTC
3'CTTAAG
5'---G     AATTC---3'
3'---CTTAA     G---5'EC
ECoR2
Eshcherichia coli
5'CCWGG
3'GGWCC
5'---     CCWGG---3'
3'---GGWCC     ---5'





Properties of Restriction Enzyme :-
1.     Restriction Enzyme जीवाणुओं से प्राप्त की जाती है |
2.     Restriction Enzyme हमेशा डीएनए को एक निश्चित क्रम पर ही काटता है |
3.     Restriction Enzyme जहाँ से काटते है वहां 6 क्षारक युग्मों का एक विशेष क्रम होता है |
4.     प्रथम Restriction Enzyme Hind || है |
5.     Restriction Enzyme double stranded डीएनए को खंडित करता है |
6.     इसमें विशिष्ट क्षारक क्रम को पहचाने की क्षमता होती है |

नामकरण Nomenclature :- Restriction Enzyme के नामकरण उनके स्रोत के आधार पर किया जाता है | Restriction Enzyme के नामकरण में परंपरागत नाम का पहला शब्द वंश ( Genus ) एवं दूसरा तथा तीसरा शब्द prokaryotic cell की जाति ( species ) से लिया जाता है | जैसे --
1.     Derivation of the EcoRI name
Abbreviation
Meaning
Description
E
Escherichia
genus
co
coli
specific species
R
RY13
strain
I
First identified
order of identification
in the bacterium


Restriction Enzyme के कार्य करने की  विधि :-
प्रत्येक Restriction Enzyme डी एन ए अनुक्रम ( sequence ) की लम्बाई के निरिक्षण के बाद कार्य करता है | जब इस एंजाइम को अपना विशिष्ट अनुक्रम को पहचान लेता है तब यह वहां डीएनए से जुड़ जाता है तथा double helix की दोनों strends को शर्करा – फास्फेट आधार स्तंभों में विशिष्ट केन्द्रों पर काटता है |
Restriction Enzyme लड़ी को palidromes स्थल के केंद्र से थोड़ी दुरी पर काटता है | यह एंजाइम विपरीत लड़ियों में दो सामान क्षरकों के बीच काटते है |

उपयोग :-  Restriction Enzyme का सर्वाधिक उपयोग आनुवंशिक इंजीनियरिंग में होता है | इसका का उपयोग डीएनए तथा प्लाज्मिड को काटने में किया जाता है | Restriction Enzyme का मुख्य उपयोग भौतिक प्रतिबंधन मानचित्र बनाने , बड़े जीनोम की sequencing तथा Gene librabry बनाने में एवं gene cloning में किया जाता है |
             


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